25 聚合酶連鎖反應(Polymerase Chain Reaction, PCR)為現代刑事 DNA 鑑定普遍使用之核心技術,其熱循環(Thermal cycle)包含三個主要步驟。關於此三步驟之先後次序及其對應之分 子作用機制,下列敘述何者最適當?
(A)變性(Denaturation)→延伸(Extension)→黏合(Annealing)。變性係使用高溫破壞細胞 核膜;延伸係利用 72℃高溫強迫游離核苷酸延長;最後降溫至 60℃進行雙股黏合
(B)黏合(Annealing)→變性(Denaturation)→延伸(Extension)。黏合係加入限制酶(Restriction enzymes)尋找目標序列;變性係升溫至 94℃切斷雙股 DNA;延伸係降溫至 60℃進行互 補鹼基配對
(C)變性(Denaturation)→黏合(Annealing)→延伸(Extension)。變性係加熱至約 94℃使 雙股 DNA 解鍊為單股;黏合係降溫至約 60℃使引子(Primers)與目標序列結合;延伸則 升溫至 72℃由 DNA 聚合酶(DNA polymerase)進行複製
(D)延伸(Extension)→變性(Denaturation)→黏合(Annealing)。延伸係先讓引子延長;再 加熱至 94℃變性解開雙股;最後降至 60℃進行黏合與修復
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