學習重點 正常血漿的水相約占93%,鈉、鉀等電解質主要分布於水相;脂質與蛋白質所占體積會影響以總檢體體積換算的結果。 高血脂、高蛋白血症使水相比例下降,間接ISE測得的鈉、鉀可假性偏低;嚴重低蛋白血症則可使結果略呈假性偏高。 直接與間接ISE的主要差別是檢體是否先稀釋:直接法不稀釋,間接法先稀釋。嚴重脂血檢體測鈉,以直接ISE較適當。 電解質測定可使用ISE、火焰放射光度法與原子吸收光譜法;質譜儀並非常規電解質測定的優先方法。 試劑配對須記住:β-galactosidase可用於酵素法測鈉、Titan yellow測鎂、OCPC測鈣。 核心觀念 一、電解質排除效應:水相比例是關鍵 正常血漿約有93%為水相、7%為脂質與蛋白質等非水相成分。鈉、鉀、氯等電解質主要存在於水相,因此必須區分「水相中的離子狀態」與「依整體血漿體積表示的測定結果」。 間接ISE取固定體積的血清或血漿,先稀釋再測定,並依校正設定換算結果。這套換算以正常血漿水相比例為前提。當脂質或蛋白質大量增加時,同樣一份檢體體積內,水相減少,帶入稀釋液中的電解質量也減少,測得結果便可能假性偏低。 這就是電解質排除效應(electrolyte exclusion effect)。其重點是非水相占據較多體積,而非脂質或蛋白質把鈉、鉀消耗掉。即使血漿水相中的離子狀態正常,間接ISE仍可能報出低值;發生在鈉時,稱為擬似低鈉血症。 同樣的體積效應也可影響鉀。因此,高蛋白血症使用間接ISE測定時,應掌握鈉、鉀皆可偏低,不能判成一低一高。 二、高脂、高蛋白與低蛋白的方向比較 檢體狀態血漿水相比例間接ISE可能出現的偏差 高血脂下降電解質假性偏低,典型表現為擬似低鈉 高蛋白血症下降鈉、鉀等電解質假性偏低 嚴重低蛋白血症上升電解質可略呈假性偏高 嚴重低蛋白血症的偏差方向與高蛋白血症相反。蛋白質減少後,同體積血漿含有較多水相,間接ISE依正常水相比例換算時,結果可能略高。因此,不宜籠統背成「低白蛋白使誤差更大」或「低蛋白一定使誤差更小」,應直接記住水相比例與偏差方向。 高血脂是典型且明顯的排除效應情境。高血糖造成血鈉下降,主要是細胞內水分移至細胞外,使細胞外液中的鈉被稀釋,機轉不同於電解質排除效應。高血鉀、高尿酸也不是此效應的典型判斷線索。 三、直接ISE與間接ISE的主要差別 離子選擇性電極法(ISE)利用選擇性膜產生的電位差,反映待測離子的活性,儀器再經校正報告結果。直接與間接法的核心區別,在於測量前是否稀釋檢體,並非必須使用不同電極膜。 比較項目直接ISE間接ISE 檢體前處理不先稀釋先依設定倍數稀釋 測量對象未稀釋檢體水相中的離子活性稀釋液中的離子活性,再換算結果 常見應用血液氣體分析、床邊檢驗等中央實驗室自動化生化分析 高脂、高蛋白影響不受典型電解質排除效應影響可出現假性低值 檢體種類依儀器設計,可使用全血、血清或血漿常規生化平台通常使用血清或血漿 檢體種類取決於儀器設計,不能把「間接法絕對不能使用全血」當成兩法的原理性定義。比較兩者時,最穩定的判斷依據是直接不稀釋、間接先稀釋;也不能說兩者皆必然屬於常規高通量生化檢測方式。 嚴重脂血檢體需要測鈉,或懷疑間接ISE出現擬似低鈉時,應優先想到直接ISE。所謂不受影響,是指不受上述水相比例改變造成的典型排除效應,並非宣稱它完全沒有其他分析誤差。 四、電解質測定方法的用途與限制 方法原理與應用應掌握的判斷 離子選擇性電極法以選擇性膜的電位反映離子活性;常見於鈉、鉀、氯及游離鈣測定須分辨直接法與間接法 火焰放射光度法測量元素受火焰激發後放出的特徵光,常用於鈉、鉀以總檢體體積取樣、稀釋換算時,可受排除效應影響 原子吸收光譜法(AAS)測量原子吸收特徵波長光線的程度,可測鈣、鎂等元素可測電解質,但不能據此認定脂血測鈉不會偏低 質譜儀可用於特定元素或其他物質的分析並非常規血中電解質測定的優先工具 高效能液相層析法(HPLC)主要用於成分分離與分析不是嚴重脂血檢體測鈉的優先選擇 題目所稱的火焰比色法,應依其火焰光度測定情境判讀。火焰光度法、原子吸收法及間接ISE,若以固定總檢體體積取樣、稀釋並換算,都可能受到水相比例下降影響;嚴重脂血測鈉時,應選直接ISE。 各種電解質適用的方法不同,不可認為同一種方法都同樣適合測定鈉、鉀、氯、鈣、鎂。例如總鈣、總鎂也常採化學呈色法;游離鈣則可使用ISE。 五、測鈉酵素與呈色試劑的配對 試劑或酵素用途辨識重點 β-galactosidase可用於血清鈉的酵素測定法利用適用酵素系統受鈉活化的特性,由反應速率估算鈉濃度 Titan yellow鎂的呈色測定配對鎂,不是鈣或鈉 o-cresolphthalein complexone(OCPC)總鈣的呈色測定配對鈣 Methyl orange酸鹼指示劑不是此處測血清鈉的試劑 常考陷阱 「高血脂使電解質假性升高」:方向相反;間接ISE的典型結果是假性偏低。 「高蛋白使鈉低、鉀高」:水相比例下降會使兩者皆可偏低。 「嚴重低蛋白也造成假性低值」:低蛋白使水相比例增加,結果可略呈假性偏高。 「間接ISE不稀釋,所以出現排除效應」:間接法需先稀釋;直接法才是不先稀釋。 「直接、間接ISE必須使用不同膜」:膜的選擇與待測離子有關,兩法的主要差別是檢體是否稀釋。 「高血糖低鈉就是擬似低鈉」:須區分水分移動造成的稀釋與非水相增加造成的測定偏差。 「AAS或質譜儀分析能力強,脂血測鈉就優先選它」:本單元應以能避開典型排除效應的直接ISE判斷。 「Titan yellow與OCPC都測鈣」:Titan yellow測鎂,OCPC測鈣;測鈉酵素則記β-galactosidase。 記憶口訣 「間接先稀釋,高脂高蛋白,水少讀值低;低蛋白水多,讀值略偏高。」 「直接免稀釋,脂血測鈉選直接;鈉配β酵素,鎂配Titan,鈣配OCPC。」