學習重點 漿細胞的形態辨識:核偏位、車輪狀(鐘面狀)染色質、深嗜鹼性細胞質、緊貼細胞核旁的核周淡染區(perinuclear halo),四者合併判斷;骨髓抹片、周邊血抹片或高倍鏡放大圖都可能考。 正常成熟漿細胞的典型表型:CD38 強陽性、CD138 陽性、CD19 陽性、CD45 陽性、CD56 陰性;CD56 是正常漿細胞最不常見的標記。 多發性骨髓瘤的異常表型:CD38⁺、CD138⁺,CD19 與 CD45 減失,CD56 異常陽性,典型組合為 CD38⁺ CD138⁺ CD19⁻ CD45⁻ CD56⁺。 確認漿細胞與克隆性:CD138 是辨識漿細胞最具特異性的表面標記;腫瘤性則靠胞質 κ/λ 輕鏈限制性證明單一克隆。 核心觀念 一、漿細胞的典型形態 漿細胞是 B 細胞終末分化、負責分泌免疫球蛋白的效應細胞。形態特徵可記為「偏核、車輪、深藍、核旁淡暈」: 核偏位:細胞呈圓形至卵圓形,細胞核圓且偏向細胞一側。 車輪狀染色質:染色質粗糙、呈塊狀沿核膜分布,形似車輪或鐘面;成熟漿細胞通常看不到明顯核仁。 深嗜鹼性細胞質:粗糙內質網及 RNA 豐富,胞質染成濃藍色。 核周淡染區:緊鄰細胞核一側的淡染或透明區域,為發達的高基氏體所在,是最具代表性的線索。 骨髓抹片中若某類細胞明顯增多,放大後具備上述特徵,應判為漿細胞,提示漿細胞腫瘤。老年患者若體重下降、倦怠、意識改變,並有貧血、血小板低下及白血球顯著增高,且周邊血大量異常細胞呈漿細胞形態,應判讀為循環中的腫瘤性漿細胞,考慮漿細胞白血病。這類細胞雖可能較不典型,仍以偏核、粗染色質、深藍胞質及核周淡染區辨認,不應誤判為反應性淋巴球或母細胞。 細胞 主要形態特徵 與漿細胞的判別重點 漿細胞 核偏位、車輪狀染色質、深嗜鹼性細胞質、核周淡染區 核旁淡染區與粗塊狀染色質最具代表性 後骨髓球 核呈腎形凹陷,胞質淡粉紅並含特異性顆粒 胞質不呈深藍,無核周淡染區 嗜中性球 核分葉,胞質淡粉紅且有細顆粒 分葉核,與單一圓形偏核明顯不同 單核球 細胞大,核摺疊或馬蹄形,染色質細緻,胞質灰藍,可有空泡 核形不規則、染色質細,胞質呈灰藍而非深藍 骨髓母細胞 核大、染色質細緻、核仁明顯,核質比高 染色質細緻且有核仁,不呈車輪狀 淋巴母細胞 核大、染色質細緻,胞質極少 高核質比,缺乏偏核及核周淡染區 大顆粒淋巴球 胞質較多、淡藍色,含粗大嗜天青顆粒 以胞質顆粒為特徵,胞質不呈深藍 非典型(反應性)淋巴球 細胞大,胞質豐富,邊緣藍染並包繞鄰近紅血球 藍色集中於胞質邊緣,核不偏位,沒有核旁淡染區 正紅母細胞(normoblast) 核圓且多位於中央,染色質隨成熟逐漸濃縮,胞質由藍轉灰藍至粉紅 早期胞質也可能深藍,但核多居中;晚期核小而緻密,胞質偏粉紅 巨核細胞 極大,多分葉核,胞質豐富含顆粒 體積與多葉核明顯不同 間皮細胞 多見於體腔液,常成群,核居中,可見細胞間窗 核居中且成群排列 破骨細胞 巨大多核細胞,胞質豐富 多核巨細胞,與單核偏位的漿細胞不同 成骨細胞 較漿細胞大,核偏位,常成群排列;淡染區與細胞核有一段距離 淡染區不緊貼細胞核,染色質不呈車輪狀,常成群出現 二、正常漿細胞與多發性骨髓瘤的免疫表型 標記 正常成熟漿細胞 多發性骨髓瘤細胞 判讀意義 CD38 強陽性 陽性(強度常較正常漿細胞弱) 漿細胞的重要標記,用於圈選漿細胞群 CD138(syndecan-1) 陽性 陽性 造血細胞中辨識漿細胞最具特異性的標記,懷疑骨髓瘤時用於骨髓確認 CD19 典型為陽性 多為陰性 B 細胞標記減失,屬異常表型 CD45 典型為陽性 多為陰性或減弱 常見的異常表型 CD56 陰性,為正常漿細胞最不常見的標記 多數病例呈異常陽性 常見於骨髓瘤細胞,正常漿細胞通常沒有,是區分兩者的重要抗原 胞質輕鏈(cytoplasmic κ/λ) 有,且 κ、λ 混合(多克隆) 有,但限於單一種(單克隆) 兩者都會表現,差別在於是否為單一種類 多發性骨髓瘤細胞最常見組合:CD38⁺、CD138⁺、CD19⁻、CD45⁻、CD56⁺。 正常漿細胞典型組合:CD38⁺(強)、CD138⁺、CD19⁺、CD45⁺、CD56⁻。 其他常見選項的歸屬: CD19、CD20:B 細胞標記,成熟漿細胞 CD20 為陰性,骨髓瘤細胞 CD19 多為陰性,因此不具漿細胞特異性。 CD34:造血幹細胞與母細胞標記,漿細胞為陰性。 CD64:主要見於單核球與嗜中性球系。 CD117:見於早期骨髓系細胞及肥大細胞,僅部分骨髓瘤表現,不能作為確認標記。 CD56:也是 NK 細胞標記,單獨陽性不具專一性,必須在 CD38⁺CD138⁺ 的漿細胞群中解讀才有意義。漿細胞白血病的 CD56 陽性率較低,陰性不能排除漿細胞腫瘤。 結論:要確認細胞是否為漿細胞,選 CD138;要區分骨髓瘤細胞與正常漿細胞,選 CD56(以及 CD19、CD45 的減失)。 三、輕鏈限制性與流式細胞儀判讀 腫瘤性漿細胞來自單一克隆,只製造一種輕鏈,因此呈現κ 或 λ 輕鏈限制性。正常或反應性漿細胞為多克隆,κ、λ 混合表現。漿細胞的免疫球蛋白主要位於胞質,表面免疫球蛋白通常很少,所以輕鏈分析以胞質染色為主。 流式細胞儀圖判讀步驟: 是否出現 CD38 強陽性和/或 CD138 陽性的細胞群,代表漿細胞。 這群細胞是否 CD19 陰性、CD45 陰性或減弱、CD56 陽性,代表異常表型。 胞質輕鏈是否只偏一種(κ 或 λ),代表單克隆。 符合上述模式即判讀為 myeloma(漿細胞腫瘤)。以下情況則屬其他疾病: CD19⁺CD5⁺CD23⁺、表面免疫球蛋白弱表現:慢性淋巴球性白血病(CLL)。 CD10⁺ 合併表面輕鏈限制性的成熟 B 細胞:濾泡性淋巴瘤。 CD34⁺、TdT⁺ 的母細胞:急性淋巴母細胞白血病(ALL)。 多發性骨髓瘤的確診還需綜合骨髓漿細胞比例、血清或尿液單株蛋白、影像及器官損害等資料,不能只憑一個標記。 常考陷阱 看到偏核就判為漿細胞:成骨細胞同樣偏核且有淡染區,但淡染區與細胞核有一段距離,且常成群出現。漿細胞的淡染區緊貼細胞核,並有車輪狀染色質。 把周邊血大量漿細胞誤判為反應性淋巴球或淋巴母細胞:反應性淋巴球是胞質邊緣藍染、包繞紅血球;母細胞染色質細緻、有核仁。偏核加核旁淡染區才是漿細胞。 把大顆粒淋巴球的顆粒當成漿細胞特徵:漿細胞胞質深藍且無明顯顆粒。 把間皮細胞、破骨細胞、巨核細胞與漿細胞混淆:前兩者看核居中或多核,巨核細胞看巨大體積與多葉核。 確認漿細胞時選 CD56、CD117 或 CD64:這些都不具漿細胞特異性。確認用 CD138。 對異常漿細胞選 CD19 或 CD20 最具特異性:這兩者是 B 細胞標記,漿細胞常為陰性;選 CD138。CD34 是母細胞標記。 把骨髓瘤組合記成 CD19⁺CD45⁺CD56⁻:這是正常漿細胞的組合。骨髓瘤是 CD19⁻CD45⁻CD56⁺,而 CD38 與 CD138 仍為陽性。 問「骨髓瘤有、正常漿細胞沒有」卻選 CD38、CD138 或胞質輕鏈:這三者兩種細胞都有,答案是 CD56。胞質輕鏈的差別在單一或混合,而非有無。 問「正常漿細胞最不常見的標記」卻選 CD45:正常漿細胞多為 CD45 陽性,最不常見的是 CD56。 以為 CD56 陰性就排除骨髓瘤:CD56 只是多數病例陽性,漿細胞白血病更常為陰性。 記憶口訣 看形態:偏核車輪、深藍淡暈貼核旁。 認漿細胞:一三八最專一,三十八最亮。 正常漿細胞:十九、四十五亮,五十六暗。 骨髓瘤:十九、四十五熄燈,五十六亮燈,輕鏈只剩一種。